مرکز آموزش عالی علوم پزشکی وارستگان

• برای جلوگیری از آلودگی نمونه‌ها و نتایج نادرست، از دستکش و لباس محافظ استفاده کنید و سطح کار را مرتباً تمیز کنید.
• مواد شیمیایی و پروب‌های فلورسانس را با دقت و به‌دور از نور مستقیم نگهداری کنید.
• دستگاه را به‌طور مرتب کالیبره کرده و تنظیمات دما و زمان را دقیقاً مطابق دستورالعمل‌ها انجام دهید.

• ابتدا نمونه‌های بیولوژیکی مانند خون یا بافت را جمع‌آوری کرده و DNA یا RNA را استخراج کنید.
• سپس هدف ژنتیکی خود را مشخص و پرایمرهای اختصاصی برای آن طراحی کنید.
• در صورت نیاز، از پروب فلورسانس برای شناسایی محصولات PCR استفاده کنید.
• یک مخلوط واکنش شامل DNA/RNA استخراج‌شده، پرایمرها، پروب (در صورت نیاز)، نوکلئوتیدهای آزاد (dNTPs)، بافر PCR و آنزیم Taq پلیمراز تهیه کرده و آن را در چاهک‌های پلیت PCR یا تیوب‌های مخصوص بارگذاری کنید.
• کنترل‌های مثبت و منفی را اضافه کنید.
• دما و زمان چرخه‌های PCR را تنظیم و دستگاه را روشن کنید تا تکثیر DNA همراه با نظارت بر فلورسانس در هر چرخه انجام شود.
• پس از اتمام واکنش، داده‌ها را تحلیل و مقدار هدف ژنتیکی را بر اساس منحنی استاندارد تعیین کنید و گزارشی از نتایج تهیه کنید.

برخی از کاربردهای رایج دستگاه qPCR  عبارتند از:

• تشخیص بیماری‌ها: دستگاه qPCR برای تشخیص بیماری‌های مختلفی مانند HIV،

هپاتیت و سرطان استفاده می‌شوند.

• تحقیقات پزشکی: دستگاه qPCR برای تحقیقات پزشکی در زمینه‌های مختلفی

مانند ژنتیک، ایمونولوژی و سم‌شناسی استفاده می‌شوند.

• کنترل کیفیت: دستگاه qPCR برای کنترل کیفیت محصولات غذایی، دارویی

و سایر محصولات استفاده می‌شوند.

• تشخیص مواد مخدر: دستگاه qPCR برای تشخیص مواد مخدر در خون،

ادرار و سایر نمونه‌های زیستی استفاده می‌شوند.