GC

معرفی دستگاه HPLC
برند دستگاه:Agilent 1100 series
معرفی HPLCمخفف High-Performance Liquid Chromatography به معنای کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا و ابزاری قدرتمند برای آنالیز مواد است. این دستگاه یکی از پرکاربردترین ابزارها در آزمایشگاه‌های شیمی، داروسازی، زیست‌شناسی و صنایع غذایی برای جداسازی و شناسایی ترکیبات مختلف در نمونه‌های مایع است و از اصول کروماتوگرافی استفاده می‌کند تا اجزای مختلف یک نمونه را بر اساس تفاوت در قطبیت، اندازه مولکولی و برهمکنش‌های دیگر جدا کند.

 

اجزای اصلی دستگاه HPLC شامل موارد زیر میباشد:

  • پمپ: مایع حامل (فاز متحرک) را با فشار بالا به داخل سیستم پمپ می‌کند.
  • اینجکتور: نمونه مایع را با دقت به داخل جریان فاز متحرک تزریق می‌کند.
  • ستون: قلب دستگاه است. ستونی حاوی ذرات بسیار ریز که نمونه را جدا می‌کند.
  • آشکارساز: ترکیبات جدا شده را شناسایی و سیگنال‌های الکتریکی تولید می‌کند.
  • سیستم داده‌برداری: داده‌های حاصل از آشکارساز را جمع‌آوری، پردازش و نمایش می‌دهد.
نکات ایمنی
  • حلال‌های مورد استفاده در HPLC باید از خلوص بسیار بالایی برخوردار باشند تا از ایجاد تداخل در نتایج جلوگیری شود.
  • حلال‌های HPLC اغلب سمی و قابل اشتعال هستند. بنابراین هنگام کار با آن‌ها باید از دستکش، عینک ایمنی و روپوش آزمایشگاهی استفاده شود.
  • آزمایشگاه باید دارای سیستم تهویه قوی باشد تا از تجمع بخارات سمی حلال‌ها جلوگیری شود.
  • پسماندهای حلال‌ها باید به صورت جداگانه و در ظروف مخصوص جمع‌آوری شوند.
  • قبل از هر بار استفاده، تمامی قسمت‌های دستگاه از جمله پمپ، انژکتور، ستون و آشکارساز باید به دقت بررسی ودستگاه مرتبا کالیبره شود.
  • نوسانات برق می‌تواند به دستگاه آسیب جدی وارد کند. بنابراین استفاده از تثبیت‌کننده ولتاژ توصیه می‌شود.
  • ورود ذرات خارجی به سیستم HPLC می‌تواند باعث مسدود شدن لوله‌ها و آسیب دیدن پمپ شود. بنابراین باید از فیلترهای مناسب استفاده شود.
  • ستون‌های HPLC بسیار حساس هستند .از قرار دادن آن‌ها در معرض نور مستقیم خورشید و تغییرات دمایی ناگهانی خودداری کنید.
  • رعایت نکات ایمنی عمومی آزمایشگاه مانند پوشیدن لباس مناسب، عدم خوردن و آشامیدن در آزمایشگاه و شستن دست‌ها پس از اتمام کار ضروری است.
روش استفاده
  • آماده‌سازی نمونه

نمونه باید در یک حلال مناسب حل شود وممکن است نیاز به فیلتر شدن یا رقیق شدن داشته باشد.

  • انتخاب فاز متحرک و ستون

انتخاب فاز متحرک و ستون مناسب بر اساس نوع نمونه و ترکیبات مورد آنالیز انجام می‌شود.

  • تنظیم پارامترهای دستگاه

فشار پمپ،جریان، دمای ستون و طول موج آشکارساز باید به دقت تنظیم شوند.

  • تزریق نمونه

حجم مشخصی از نمونه به داخل انژکتور تزریق می‌شود.

  • جداسازی و شناسایی

ترکیبات مختلف نمونه در ستون از هم جدا می‌شوند و توسط آشکارساز شناسایی می‌شوند.

  • تفسیر داده‌ها

داده‌های حاصل از آشکارساز به صورت یک کروماتوگرام نمایش داده می‌شود که در آن هر پیک نشان‌دهنده یک ترکیب است.

 کاربردها صنعت داروسازی: آنالیز داروها، ناخالصی‌ها و محصولات تخریب شده

صنعت غذایی: آنالیز ویتامین‌ها، آنتی‌اکسیدان‌ها، رنگدانه‌ها و افزودنی‌های غذایی

صنعت محیط زیست: آنالیز آلاینده‌ها در آب و خاک

آزمایشگاه تشخیص طبی: آنالیز پروتئین‌ها، اسیدهای آمینه و سایر بیومولکول‌ها

پزشکی قانونی: شناسایی مواد مخدر و سموم

دروس مرتبط بیوشیمی پزشکی 1 ، آزمایشگاه تجزیه دستگاهی،آزمایشگاه کنترل کیفی 1، آزمایشگاه کنترل کیفی 2

امکان درج دیدگاه بسته شده است