معرفی دستگاه ترمال سایکلر (Thermal Cycler)
معرفی دستگاه ترمال سایکلر (Thermal Cycler) دستگاه اجرای PCR با کنترل دقیق دما و زمان است. کیفیت دستگاه در دقت دمایی، یکنواختی بلوک (uniformity)، نرخ تغییر دما (ramp rate) و قابلیت جلوگیری از تبخیر (heated lid) نمود پیدا می‌کند. این ویژگی‌ها مستقیماً بر اختصاصیت و بازده PCR اثر می‌گذارند.
نکات ایمنی
  • پیشگیری از آلودگی PCR: آلودگی DNA یکی از مهم‌ترین مشکلات PCR است. تفکیک فیزیکی نواحی (پیش-PCR/پس-PCR)، استفاده از نوک سمپلر فیلتر‌دار، تعویض دستکش، و استفاده از کنترل منفی ضروری است.
  • ایمنی کار با مواد: برخی رنگ‌ها/مواد مانند اتیدیوم بروماید ممکن است خطرناک باشند.
  • سوختگی/حرارت: بلوک و درب گرم‌کننده داغ می‌شوند؛ تماس مستقیم کاهش یابد.
  • کالیبراسیون: برای کاربردهای تشخیصی یا پژوهش حساس، کالیبراسیون دوره‌ای دما و صحت heated lid توصیه می‌شود.
  • بستن صحیح لوله‌ها: تبخیر یا نشتی می‌تواند غلظت واکنش را تغییر دهد و نتیجه را مخدوش کند.
روش استفاده
  • آماده‌سازی Master Mix و توزیع بین نمونه‌ها
  • قرار دادن در لوله/پلیت PCR و بستن درب
  • تنظیم برنامه (Initial denaturation, cycling, final extension, hold)
  • اجرای برنامه و سپس نگهداری محصول در 4°C
  • بررسی محصول با ژل یا روش‌های دیگر
 کاربردها
  • تکثیر DNA، ژنوتایپینگ و تشخیص مولکولی
  • RT-PCR (در کنار مرحله سنتز cDNA)
  • آماده‌سازی برای تعیین توالی و کلونینگ
دروس مرتبط ژنتیک

امکانات و تجهیزات

لینکدینواتس اپتلگرامایمیلچاپ

Related Posts ...

امکان درج دیدگاه بسته شده است